型號: 更新時間:2023-10-23
甲基化檢測分子生物技術(shù)服務(wù) DNA甲基化存在于大多數(shù)真核生物中,一般發(fā)生在CpG雙核苷酸中胞嘧啶的5’UTR區(qū),起調(diào)控作用。CpG的胞嘧啶大概有80%被甲基化,20%處于基因調(diào)控區(qū)的CpG島中。
品牌 | 上海創(chuàng)凌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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主要用途 | 通過對疾病及正常對照樣本的靶基因進行甲基化分析,在研究腫瘤發(fā)生機制及早期診斷等方 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
甲基化檢測分子生物技術(shù)服務(wù)介紹
DNA甲基化存在于大多數(shù)真核生物中,一般發(fā)生在CpG雙核苷酸中胞嘧啶的5’UTR區(qū),起調(diào)控作用。CpG的胞嘧啶大概有80%被甲基化,20%處于基因調(diào)控區(qū)的CpG島中。BSP甲基化測序(Bisulfite Genomic Sequencing PCR)的原理通過對基因組DNA進行重亞硫酸鹽處理,非甲基化的胞嘧啶被脫氨基而轉(zhuǎn)變成尿嘧啶,在隨后的PCR反應(yīng)中尿嘧啶轉(zhuǎn)變成胸腺嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不能被脫氨基,在反應(yīng)完成時被保留,我們將擴增得到的PCR產(chǎn)物進行TA克隆測序,就可以分析甲基化發(fā)生的具體情況。該方法實驗結(jié)果準確性高,是甲基化檢測的金標準。通過對疾病及正常對照樣本的靶基因進行甲基化分析,在研究腫瘤發(fā)生機制及早期診斷等方面均具有重要的臨床意義。
甲基化檢測分子生物技術(shù)服務(wù)實驗流程
Q:常見的甲基化測定方法有哪些,優(yōu)缺點是什么?
常見方法 | 優(yōu)缺點 |
MSP法(Methylation-specific PCR,MSP):重亞硫酸鹽處理基因組DNA,分別設(shè)計針對甲基化和非甲基化序列的引物進行PCR。通過電泳檢測MSP擴增產(chǎn)物,如果對甲基化DNA鏈的引物能得到擴增片段,則說明該位點存在甲基化;反之,說明被檢測的位點不存在甲基化。 | 無需挑克隆測序,步驟簡單,但對引物設(shè)計的要求較高,容易出現(xiàn)PCR假陽性,影響實驗結(jié)果分析。 |
BSP法(Bisulfite sequencing PCR ,BSP):重亞硫酸處理基因組DNA,設(shè)計BSP引物擴增,將PCR產(chǎn)物克隆至T載體測序,分析CpG位點是否發(fā)生甲基化。 | 可明確樣本待測區(qū)段每個CG位點的甲基化程度;受實驗方法和價格因素限制無法高通量。 |
高分辨率熔解曲線法(High Resolution Melting ,HRM):重亞硫酸處理基因組DNA,未甲基化的胞嘧啶經(jīng)PCR擴增后轉(zhuǎn)變成胸腺嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變,導(dǎo)致樣品中的GC含量發(fā)生改變后溶解溫度變化,從而進行分析。 | 檢測方法高通量,但是無法明確每個CG位點的甲基化程度。 |
客戶須知:
| 實物 | 數(shù)據(jù)信息 | 實驗周期 |
客戶提供 | 待測樣本 | 待測序列信息 | 7周或以上 |
我們提供 | 無 | 基本實驗步驟、測序報告、圈點圖 |
收費標準
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