NuSmart®核酸直接釋放試劑盒為植物樣本加持
——買液氮成為過去式
植物樣本的傳統(tǒng)提取DNA或RNA之前都需要對樣本進(jìn)行液氮研磨破壞細(xì)胞壁，這樣做的好處有以下幾點(diǎn)：
1、植物細(xì)胞具有堅(jiān)固的細(xì)胞壁，特別是纖維素和木質(zhì)素等成分，使用液氮研磨可以有效地破壞這些細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使得細(xì)胞內(nèi)DNA/RNA更容易釋放；
2、低溫環(huán)境有助于減少核酸酶的活性，提高核酸的提取質(zhì)量和產(chǎn)量；
3、使樣本均勻破碎，增加提取試劑與核酸的接觸面積，提高核酸提取的效率；
4、對于長片段研究時(shí)，更能保持完整性；
看來液氮研磨是不可少的步驟，但是一旦樣本量成百上千，液氮研磨就成為繁瑣的限速步驟，而且液氮的溫度低至-196℃，使用過程中極易誤傷，對實(shí)驗(yàn)室人員安全意識要求很高。總結(jié)發(fā)現(xiàn)使用液氮有以下幾個缺點(diǎn)：
1、溫度極低，使用過程中需要佩戴手套和護(hù)目鏡；
2、起始樣本量大一些，避免研磨過程中損失；
3、無法高通量操作；
4、無法自動化操作；
5、操作需謹(jǐn)慎，導(dǎo)致提取DNA時(shí)間延長數(shù)倍；
那怎么辦呢？NuSmart®核酸直接釋放試劑盒來助力，試劑盒中PL-DNA Lysis和葉片混合后，55℃反應(yīng)5分鐘，DNA模板就制備好了，操作流程見下圖。整個操作流程非常簡單，不用擔(dān)心液氮使用問題，也不用擔(dān)心一天的效率太低，提高整個工作效率。
NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)的優(yōu)勢是什么?劃重點(diǎn)來了——
√對于小量和微量樣本十分友好
√操作簡單，無需訓(xùn)練
√基因組完整性好
√無酶、無有機(jī)試劑
√無大型設(shè)備投入
總結(jié)來說，NuSmart®核酸直接釋放試劑盒中不含有任何有毒、易燃、易爆成分，甚至無需佩戴手套即可取用。
樣本量低對于分子生物實(shí)驗(yàn)室科研人員來說一直都是一個痛點(diǎn)，例如☆法醫(yī)鑒定的拭子含量都是微量
☆待分類細(xì)菌沒有合適的培養(yǎng)基培養(yǎng)，產(chǎn)量很低
☆流式分選后細(xì)胞很少很少
之所以是痛點(diǎn)，主要是因?yàn)榘凑諏?shí)驗(yàn)室常用核酸提取方法只有離心柱提取法或者磁珠提取法，這些方法都需要大量樣本支持。例如30mg組織、106個細(xì)胞、100mg水稻葉片、1mL血液等等。這些條件成為下游實(shí)驗(yàn)的限速因素。庫思擇開發(fā)的NuSmart®核酸直接釋放試劑盒對微量樣本非常友好，甚至一個細(xì)胞不在話下。參考下圖，使用NuSmart®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus對一個細(xì)胞進(jìn)行處理后，可以有效擴(kuò)增長達(dá)4kb的基因。
使用NuSmart®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus（貨號Nu-C01）處理1個Sp2/0細(xì)胞，使用2×Master TaqMix(With Dye)擴(kuò)增不同長度基因（分別0.5kb、1kb、2kb、3kb、4kb）。
總結(jié)來說無論樣本多少，只要有完整結(jié)構(gòu)、有核酸NuSmart®試劑盒都能夠解決。
目前可以使用的樣本參考如下：
來源 | 范圍 |
細(xì)胞 | 293T、A549、Vero、PK15、Sp2/0、HCT-116、Marc145、ST、siHa、MCF-7 |
人 | 頭發(fā)、唾液、咽拭子、全血、精液、腫瘤切片 |
小鼠 | 心、肝、脾、肺、腎、腦、脊柱、胃、大腸、小腸、膽囊、尾巴、腳趾、皮、耳朵、肌肉、EDAT 抗凝血、肝素鈉抗凝血、枸櫞酸鈉抗凝血 |
豬/雞/羊 | 心、肝、脾、肺、腎、淋巴結(jié)、精液、全血、血清 |
亞洲鯽魚 | 魚鰭、魚泡、魚鱗、魚籽 |
病毒 | ASFV、PRV、PPV、PCV |
細(xì)菌 | 金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、農(nóng)桿菌、結(jié)核桿菌、糞腸球菌、鏈球菌 |
真菌 | 酵母菌、曲霉菌、犬小孢子菌、口蘑、平菇、白木耳 |
植物
| 煙草、擬南芥、油菜、水稻、大豆、玉米、小麥、棉花、百脈根、西紅柿、土豆、茄子、胡蘿卜、龍眼、荔枝、蘋果、香蕉、葡萄 |
中草藥 | 鐵皮石斛、丹參、益母草、紅花、紫草、苦參、艾葉、靈芝、麥冬、金銀花、淫羊藿、茯苓、蒼術(shù)、白術(shù)、百合、半夏 |
其他微生物 | 支原體、衣原體、螨蟲、跳蟲 |
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