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生物學(xué)實(shí)驗(yàn)之線粒體組學(xué)-線粒體膜電位檢測(cè)技術(shù)服務(wù)的實(shí)驗(yàn)原理
更新時(shí)間:2022-09-20   點(diǎn)擊次數(shù):456次

技術(shù)原理

JC-1 是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢(shì)依賴(lài)性的方式積聚在線粒體內(nèi),可以用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不僅可用于定性檢測(cè),因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測(cè),因線粒體的去化程度可以通過(guò)紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來(lái)衡量。

實(shí)驗(yàn)方法

Step1:細(xì)胞培養(yǎng)

Step2:轉(zhuǎn)染或藥物處理

Step3:細(xì)胞收集

Step4:加 JC-1 試劑

Step5:上機(jī)檢測(cè)

案例展示

流式檢測(cè)線粒體膜電位

實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

1. 實(shí)驗(yàn)周期:2-3周

2. 交付標(biāo)準(zhǔn):流式檢測(cè)圖、比值、原始數(shù)據(jù)、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器)

需確認(rèn)的信息

1. 樣本的種屬及類(lèi)型(組織還是細(xì)胞)

2. 樣本數(shù)量

3. 是否提供探針

4. 拍照要求、分析要求


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