技術(shù)服務(wù)介紹
油紅O對脂滴的染色機(jī)制一般認(rèn)為是物理學(xué)上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂質(zhì)染色,即油紅O先溶于60%異丙醇中,然后切片浸入油紅O染液中時(shí),油紅O在組織脂質(zhì)的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高,所以在染色時(shí)油紅O從60%異丙醇中轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)中使脂滴顯示紅色。
細(xì)胞周圍在鏡下呈現(xiàn)空泡時(shí),究竟是水樣變性、糖原,還是被溶解的脂肪?就需要用脂質(zhì)染色來幫助鑒別診斷,如脂肪瘤或脂肪肉瘤,脂肪染色呈陽性。腎的透明細(xì)胞癌,在癌細(xì)胞胞質(zhì)透亮,但脂肪染色為陰性。腎上腺皮脂腺瘤質(zhì)染色也為陽性。動(dòng)脈粥樣硬化時(shí),可見內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)有脂質(zhì)沉著。脂滴顯示紅色,細(xì)胞核呈淺藍(lán)色。
服務(wù)流程
油紅O染色步驟
固定:將冰凍切片復(fù)溫干燥10min;細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定15min,PBS漂洗3次,5min/次。
染色:入油紅O工作液孵育10-15min;細(xì)胞爬片破膜10-15min,PBS漂洗3次,5min/次,入油紅O工作液37°染色1-2h。
分化:75%酒精分化2s,水洗1min。
復(fù)染細(xì)胞核:Harris蘇木素復(fù)染1-2min左右,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,氨水返藍(lán),流水沖洗。
封片:用紙巾吸去周邊水分,甘油明膠封片。
染色結(jié)果:脂滴呈橘紅色至鮮紅色,細(xì)胞核藍(lán)色。
客戶需知
由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑,所以一般用冰凍切片染色來顯示。
作脂肪染色的冰凍切片不能太薄,過薄的切片常會(huì)使脂質(zhì)丟失。
蘇木素復(fù)染時(shí)間不能過長。
染色結(jié)果不能長期保存,應(yīng)盡快觀察及照相。
整個(gè)操作過程中注意動(dòng)作宜輕柔,不宜動(dòng)作太大,以免脂肪丟失或移位。
甘油明膠常溫下為凝固狀,用前30min放入60°烘箱或入60°溫水促其成液狀,其封片后易產(chǎn)生氣泡,所以要趁甘油明膠從烘箱中拿出來后盡快封片。
封片后如有氣泡不能按壓改玻片也不宜強(qiáng)行扯下蓋玻片,玻片可入60-70°溫水中,讓蓋玻片自行脫落,然后重新封片,以防脂肪移位。
實(shí)驗(yàn)周期
本公司常規(guī)實(shí)驗(yàn)周期為15個(gè)工作日。(不含送貨時(shí)間)
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
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